高效液相色譜儀應(yīng)用
南京科捷分析儀器有限公司專業(yè)生產(chǎn)、提供銷售氣相色譜儀简些，液相色譜儀蛉增，色譜配套產(chǎn)品，色譜配件篱撩。
例1．稠環(huán)芳烴分析（環(huán)境氣體分析）
樣 品：含六苯并苯等8種稠環(huán)芳烴的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀践寄，配有色譜工作站
檢測(cè)器：UV紫外檢測(cè)器，340nm
色譜柱：C18鍵合相（ODS-224）,5μm缓鞠，柱長(zhǎng)25cm檩渐，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：甲醇-二氯甲烷（8:2）混合溶劑
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在25min之內(nèi)全部流出，各組分完全分離业抵，組分出峰順序?yàn)椋毫讲⒈教昴矗蕉燎侗剑蕉燎侗较盟椋捷敛⒍燎侗胶τ伲谋蕉燎侗剑亮讲⒈剑捷敛⒍燎侗娇悖椒撇⑽灞健?span lang="EN-US">
例2．磺胺分析（藥物分析）
樣 品：磺胺镶奉、磺胺嘧啶、磺胺甲基異噁唑和甲氧芐氨嘧啶的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀崭放，740色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)
檢測(cè)器：UV 481型紫外檢測(cè)器哨苛，波長(zhǎng)240nm
色譜柱：μ-Bondapak C18 , 5μm，柱長(zhǎng)25 cm莹菱，柱徑4.6 mm
流動(dòng)相：由KH2PO4（0.05mol/L）和Na2HPO4（0.05 mol/L）以及MeOH所組成移国，其用量比例為200:10:165，
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分在6min之內(nèi)全部流出道伟，各組分完全分離迹缀，組分出峰順序?yàn)椋夯前繁Ａ魰r(shí)間為2.60 min, 磺胺嘧啶保留時(shí)間為3.18 min、磺胺甲基異噁唑保留時(shí)間為4.33 min,甲氧芐氨嘧啶保留時(shí)間為5.19min蜜徽。
例3．銀杏內(nèi)酯分析（藥物分析）
樣 品：含銀杏苦內(nèi)酯等4種物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀
配有570自動(dòng)進(jìn)樣器祝懂，Rheadyane 77251進(jìn)樣閥，HP化學(xué)工作站
檢測(cè)器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為91℃拘鞋，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.75L/min
色譜柱：Platinum OPS窜旺，5μm，柱長(zhǎng)25cm驶闰，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：水:甲醇:四氫呋喃 = 75:20:10
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分在15min之內(nèi)全部流出杏紫，各組分完全分離，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為銀杏苦內(nèi)酯C, 峰2為白果內(nèi)酯, 峰3銀杏苦內(nèi)酯A, 峰4為銀杏苦內(nèi)酯B阔垢。
例4．脂肪酸甲酯分析（藥物分析）
樣 品：含5種脂肪酸甲酯的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀申蔗，配有色譜工作站
檢測(cè)器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為45℃，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">1.5L/min
色譜柱：Silver Impregnated Ion-Exchange ,柱長(zhǎng)25cm挨奶，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：乙腈:甲醇 = 2:98
流 速：0.75mL/min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分在10min之內(nèi)全部流出些玖，各組分完全分離，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為C18：0脂肪酸甲酯粥萍，峰為C18：1脂肪酸甲酯步垢，峰3為C18：2脂肪酸甲酯，峰4為C18：3脂肪酸甲酯犀挠，峰1為C20：4脂肪酸甲酯易解。
例5．茶堿分析（茶葉）
樣 品：含茶堿等三種物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有色譜工作站
檢測(cè)器：UV紫外檢測(cè)器燎字，280nm
色譜柱：Micro μBondapak C18 腥椒，8μm，柱長(zhǎng)25 cm轩触，柱徑4.6 mm
流動(dòng)相：二甲基二酰胺:甲醇:醋酸:水 = 23.5:1:0.5:75（v/v）
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分8min之內(nèi)全部流出寞酿，各組分完全分離，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為可可堿脱柱，峰2為茶堿伐弹，峰3為咖啡堿。
例6．脂肪酸直接分析
樣 品：未經(jīng)衍生處理的亞麻酸等6組分的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀榨为，四元梯度泵惨好，色譜工作站
檢測(cè)器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為65℃，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.0L/min
色譜柱：AlltimaTM C18 随闺，5μm日川，柱長(zhǎng)25cm，柱徑2.1mm
流動(dòng)相：A為水矩乐，B為乙腈
梯 度 時(shí)間 0min 10min 15min 20min
A 13% 20% 20% 5%
B 77% 80% 80% 95%
流 速：0.4mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分20min之內(nèi)全部流出龄句，各組分完全分離，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為亞麻酸恋猜，峰2為肉豆蔻酸畦洞，峰3為亞油酸，峰4為棕櫚酸贰嚷，峰5為油酸铡捉，峰6為硬脂酸。
例7：氨基酸衍生物分析（食品分析）
樣 品：22種氨基酸的苯基乙酰硫脲混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀泵位，梯度洗脫裝置劲徙，色譜工作站
檢測(cè)器：UV紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)254nm
色譜柱：柱長(zhǎng)25cm辙肿，柱徑0.46cm Zorbax ODS柱（Dupont）
流動(dòng)相：A液為0.01mol/L的NaAc, pH =4.5
B液為CH3CN
梯 度：0min～6min B/A = 24/76～42/58（v/v）
6min～14min B/A = 42/58（v/v）
14min～20min B/A = 24/76（v/v）
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣10μL
結(jié) 果：所有組分在20min之內(nèi)全部流出秘挥，各組分完全分離，組分出峰順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為ASP褥疆，峰2為GLU兆焦，峰3為ASN，峰4為SER永铛，峰5為GLN生碗，峰6為THR，峰7為GLY驾窟，峰8為MET·SO2 ,峰9為HYP, 峰10為ALA庆猫，峰11為TYR，峰12為HIS绅络，峰13為CYS（CH2）月培，峰14為VAL，峰15為MET恩急，峰16為PRO杉畜，峰17為TRP纪蜒，峰18為LYS，峰19為PHE此叠，峰20為ILE纯续，峰21為LEU，峰22為ARG灭袁。
例8．氨基酸直接分析
樣 品：12種未衍生氨基酸混合物溶液（1mMol/L）
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀猬错，四元梯度泵
配有二極管陣列檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器和化學(xué)工作站
檢測(cè)器：500型ELSD蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為95℃茸歧，氮?dú)饬魉?span lang="EN-US">2.5L/min
色譜柱：Alltima C18 , 5μm倦炒，柱長(zhǎng)25cm，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：A為含0.1% TFA的水
B為含0.1% TFA的乙腈
梯 度: 時(shí)間 0min 5min 20min
A液 100% 100% 60%
B液 0% 0% 40%
流 速：0.6mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在25min之內(nèi)全部流出晶会，各組分完全分離毁兼，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為絲氨酸，峰2為賴氨酸禀瓜，峰3為谷氨酸姿抒，峰4為精氨酸，峰5為脯氨酸盒伸，峰6為纈氨酸茂蓬，峰7為甲硫氨酸，峰8為酪氨酸橘沾，峰9為異亮氨酸吴钧，峰10為亮氨酸，峰11為苯丙氨酸仲它，峰12為組氨酸宙娃。
例9．糖類分析（食品分析）
樣 品：含果糖等6種糖類物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，四元梯度泵兜飒，色譜工作站
檢測(cè)器：Mark ⅡA型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為100℃幻林，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.2L/min。
色譜柱：Absorbosphere, NH2 音念，柱長(zhǎng)25cm沪饺，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：A為乙腈，B為水
梯 度：時(shí)間 0min 20min
A 85% 75%
B 15% 25%
流 速：1.5mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在24min之內(nèi)全部流出闷愤，各組分完全分離整葡，組分流出順序依次為：峰1為果糖，峰2為葡萄糖讥脐，峰3為蔗糖遭居，峰4為麥芽糖，峰5為乳糖旬渠，峰6為棉籽糖俱萍。
例10．嘌呤分析（藥物分析）
樣 品：取1mL血漿加入200μL的1.98mol/L的高氯酸（GR）端壳，再加入600μL蒸餾水和200μL的1.47mol/L的別嘌呤醇（內(nèi)標(biāo)），用旋轉(zhuǎn)混合器振搖10s于1200g離心10min枪蘑，取上層清液備分析用更哄。
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有色譜工作站
檢測(cè)器：UV紫外檢測(cè)器齿矗，254nm
色譜柱：μBondapsk C18 ，10μm秤瞒，柱長(zhǎng)30cm爷凫，柱徑3.9mm
流動(dòng)相：0.02mol/L的磷酸二氫鉀，pH = 2.2
流 速：2.0mL/min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分在12min之內(nèi)全部流出侵透，各組分分離完全罪团，保留時(shí)間依次為：尿嘌呤為3.18min（峰1），腺嘌呤為3.21 min（峰2）逞脚，次黃嘌呤為3.90 min（峰3）嗤渔，5-羥基吡嗪酸為4.75min（峰4），5-羥基吡嗪胺為5.31 min（峰5）霸篡，黃嘌呤為5.90 min（峰6）薯湾，吡嗪酸為7.35min（峰7），內(nèi)標(biāo)別嘌呤醇為8.53min（峰8）吹毫，吡嗪胺為9.57min（峰9）线满。
例11．植物甾醇分析（生物制藥）
樣 品：含β-谷甾醇、豆甾醇龟卷、菜油甾醇同诫、菜籽甾醇和膽固醇的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有色譜工作站
檢測(cè)器：Alltech 2000型 ELSD蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為
色譜柱：Supecol Discouery C18 , 5μm误窖，柱長(zhǎng)25cm ，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：甲醇
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分在19min之內(nèi)全部流出秩贰，各組分完全分離霹俺，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為菜籽甾醇保留時(shí)間13.70min，峰2為膽固醇保留時(shí)間14.62 min毒费，峰3為豆甾醇保留時(shí)間15.45min吭服，峰4為菜油甾醇保留時(shí)間15.97min，峰5為β-谷甾醇保留時(shí)間17.05min蝗罗。
例12．甾族化合物分析
樣 品：含孕酮等4種物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀艇棕，四元梯度泵，色譜工作站
檢測(cè)器：Mark ⅡA型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為135℃串塑，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">1.2L/min沼琉。
色譜柱：Hyperil C18 ,5μm北苟，柱長(zhǎng)25cm，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：甲醇:水 = 70:30
流 速：1.2mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在12min之內(nèi)全部流出琉枚，各組分完全分離酌涮，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為氫化可的松，峰2 為強(qiáng)的松更鼻，峰3為睪酮丑炒，峰4為孕酮。
例13．皮質(zhì)醇分析
樣 品：含皮質(zhì)醇等5種物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀措铸，配有色譜工作站
檢測(cè)器：熒光檢測(cè)器芬阀，流動(dòng)池30μL
激發(fā)波長(zhǎng)370nm ,檢測(cè)波長(zhǎng)480nm，狹縫均為20nm
色譜柱：Finepak C18 废含，10μm讽渐，柱長(zhǎng)25cm，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：甲醇:水 = 50:100（v/v）
流 速：0.8 mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分70min之內(nèi)全部流出锰玩，各組分完全分離揭斥，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為皮質(zhì)醇保留時(shí)間15.8min，峰2為β-Methasone保留時(shí)間20.0min辣胚，峰3為四氫皮質(zhì)酮保留時(shí)間22.5min眶衙，峰4為四反皮質(zhì)醇保留時(shí)間32.5 min，峰5為四氫-11-脫氧皮質(zhì)醇保留時(shí)間65.8min柠横。
例14．膽固醇分析
樣 品：含膽固醇等6組分的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀王滤，配有色譜工作站
檢測(cè)器：ELSD美國(guó)Alltech MKⅢ蒸發(fā)激光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為65℃，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.0L/min滓鸠。
色譜柱：Allsphere Silica 雁乡，3μm，柱長(zhǎng)10cm糜俗，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：A為離子對(duì)試劑踱稍，B為正己烷，C為水
梯 度：時(shí)間 0min 7min 15min
A 58% 52% 52%
B 40% 40% 40%
C 2% 8% 8%
流 速：1.25mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在13min之內(nèi)全部流出悠抹，各組分完全分離珠月，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為膽固醇，峰2為棕櫚酸楔敌，峰3為磷脂酰乙醇胺啤挎，峰4為磷脂酰絲氨酸，峰5為磷脂酰膽堿卵凑，峰6為神經(jīng)鞘磷脂庆聘。
例15．磷脂分析（生物）
樣 品：含磷脂酰肌醇等4種物質(zhì)混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，四元梯度泵淋话，色譜工作站
檢測(cè)器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為120℃商寝，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.7L/min筝便。
色譜柱：Rosil NH2 ，5μm愁淀，柱長(zhǎng)15cm匆力，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：A為無(wú)水乙醇，B為0.2mol/L的草酸溶液
梯 度：時(shí)間 0min 15min 30min 30.1min 35.1min
A 95% 85% 85% 95% 95%
B 5% 15% 15% 5% 5%
流 速：1.5mL/min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分在35min之內(nèi)全部流出曙椎，各組分完全分離龟些，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為磷脂酰乙醇胺, 峰2為磷脂酰絲氨酸, 峰3為磷脂酰膽堿, 峰4為磷脂酰肌醇。
例16．多肽分析（生物）
樣 品：含G-Y等3種多肽物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀卤诗，配有色譜工作站
檢測(cè)器：ELSD美國(guó)Alltech MKⅢ蒸發(fā)激光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為110℃棘扯，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.19L/min
色譜柱：AlltimaTM C18 ，5μm搁赘，柱長(zhǎng)25cm，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：0.05%TFA水溶液:乙腈 = 65:35
流 速：0.6mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在5min之內(nèi)全部流出棋躬，各組分完全分離愁反，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為G-Y，峰2為G-L-Y剪勿，峰3為K-D贸诚。
例17．維生素分析（食品分析）
樣 品：含維生素A等5種物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有工作站
檢測(cè)器：500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為70℃厕吉，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.0L/min
色譜柱：Adsorbosphere C18 酱固，5μm，柱長(zhǎng)25cm头朱，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：甲醇:乙醇 = 97:3
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在21 min之內(nèi)全部流出运悲，各組分完全分離，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為維生素A项钮，峰2為維生素D2班眯，峰3為維生素D3，峰4為維生素E烁巫，峰5為維生素K1 署隘。
例18．抗菌素分析（藥物）
樣 品：含有紅霉素等5種抗菌素的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀
配有570自動(dòng)進(jìn)樣器，Rheadyane 77251進(jìn)樣閥亚隙，HP化學(xué)工作站
檢測(cè)器：2000型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為95℃磁餐，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.0L/min
色譜柱：AlltimaTM C18 ,5μm，柱長(zhǎng)15cm掰砌，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：A為0.2% 五氟丙酸, B為甲醇
梯 度：時(shí)間 0min 5min
A/B 55%/45% 35%/65%
流 速：1mL/ min
進(jìn) 樣：10μL
結(jié) 果：所有組分在6min之內(nèi)全部流出瞪殖，各組分完全分離，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為紅霉素学岔，峰2為鏈霉素舞绝，峰3為托布霉素童丢，峰4為阿米卡星，峰5為新霉素吆踏。
例19．無(wú)活菌素分析（生物制藥）
樣 品：含無(wú)活菌素等5種物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀
配有570自動(dòng)進(jìn)樣器择车，Rheadyane 77251進(jìn)樣閥，HP化學(xué)工作站
檢測(cè)器：2000型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為96℃轩丁，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">2.9L/min
色譜柱：AlltimaTM C18 ,5μm阀严，柱長(zhǎng)25cm，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：THF:水 = 60:40
流 速：1mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在20min之內(nèi)全部流出仙商，各組分完全分離砚凳，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為無(wú)活菌素，峰2為單活菌素钞钙，峰3為二活菌素鳄橘，峰4為三活菌素，峰5為四活菌素芒炼。
例20．非離子型去垢劑分析（化學(xué)化工）
樣 品：3種非離子型去垢劑物質(zhì)的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀瘫怜，配有色譜工作站
檢測(cè)器：2000型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
漂移管溫度為65℃，氮?dú)饬魉贋?span lang="EN-US">1.9L/min
色譜柱：Alltech EconosphereTM C18 ,5μm本刽，柱長(zhǎng)15cm鲸湃，柱徑4.6mm
流動(dòng)相：甲醇:水 = 90:10
流 速：0.8mL/min
進(jìn) 樣：20μL
結(jié) 果：所有組分在5 min之內(nèi)全部流出，各組分完全分離子寓，組分流出順序?yàn)椋悍?span lang="EN-US">1為n-葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙暗挑，峰2為n-十二烷基-β-D-吡喃葡萄糖甙，峰3為n-辛葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙斜友。
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