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顯微鏡在臨床的操作知識

光學顯微鏡是獸醫(yī)臨床診療中最常用的工具之一孤澎,常規(guī)的樣本檢驗均需要使用光學顯微鏡戏筹,如血液珍媚、尿液、糞便断迁、體腔液等耙窥,因此光學顯微鏡的使用尤為重要。那么關于光學顯微鏡的認識蜒媳、使用跷缀、保養(yǎng)和維護,您知多少古贡,希望以下的內容會給您帶來一些幫助那捍。

以下介紹光學顯微鏡結構的主要部分:

  1. 目鏡: 將物鏡放大的實像進一步放大成一個起立的虛像,其作用相當于一個放大鏡签党,但是目鏡并不增加光學顯微鏡的分辨力槐滔。一般光學顯微鏡備有幾個放大倍數(shù)不同的目鏡,放大倍數(shù)會刻在目鏡邊緣谒所,如 5x 热康、 10x 和 15x 等,臨床最常用放大 10x 的目鏡劣领。

  1. 物鏡: 多數(shù)復式顯微鏡有 3 個或 4 個物鏡姐军,每個物鏡的放大率都不同,多數(shù)物鏡的放大倍數(shù)包括: 4x (掃描)尖淘、 10x (低倍)奕锌、 40x (高倍)和 100x (油鏡)。物體的放大倍數(shù)為目鏡的放大倍數(shù)乘以物鏡的放大倍數(shù)村生,如物體放置在 4x 的物鏡下惊暴,用 10x 目鏡觀察,鏡下的放大倍數(shù)為 40x [ ( 4x ) X ( 10x ) ] 趁桃。

  2. 聚光器: 作用是會聚由反射鏡反射來的光線辽话,增加標本的照明,升降聚光器卫病,可調節(jié)照明強度和改變對比度油啤。

  3. 光圈環(huán): 由十余片金屬薄片組成,中心部分形成圓孔膏娃,通過旋轉光圈環(huán)揖漫,可調節(jié)圓孔的大小,由此調節(jié)光線的強弱篓释。

  4. 粗準焦螺旋和細準焦螺旋: 調節(jié)物鏡與標本之間的距離垄坡,使物鏡的焦點對準標本,得到更清晰的圖像采璧,粗準焦螺旋旋轉一周可使鏡筒升降 20mm 琼葫,細準焦螺旋每旋轉一周可使鏡筒升降 0.1mm 或更小罩音。

1 、調整合適的座椅高度和顯微鏡的擺放位置

對于長時間需要觀看顯微鏡的臨床工作者來說蚯巍,這一點非常重要试旬,主要是保證自己身體健康的情況下也能感受到工作的舒適。

合適的座椅高度:顯微鏡的擺放位置:1 )顯微鏡應該長期放置在一個平坦浅涛、不需要挪動和不被震動的地方注寥,應該遠離離心機和振蕩器;2 )周圍有足夠的空間放置玻片和參閱書籍恤锣。

2. 使用光學顯微鏡的步驟

  1. 調節(jié)粗準焦螺旋廷蓉,將載物臺調節(jié)到最低點,打開光源马昙,檢查目鏡桃犬、物鏡和 聚光器鏡頭,必要時進行清潔行楞;

  2. 將載玻片放置在載物臺上攒暇,固定在樣本固定器中間,旋轉物鏡轉換器子房, 4x 物鏡下掃查觀察區(qū)域形用,獲得樣本的整體印象;

  3. 旋轉物鏡轉換器证杭,在 10x 物鏡下對準觀察物田度,注意不要直接旋轉物鏡;

  4. 在目鏡下觀察躯砰,調節(jié)目鏡的距離每币,使雙孔目鏡觀測的區(qū)域相近携丁,直到雙眼觀察的視野相同琢歇;

  5. 調節(jié)聚光器、光圈和粗準焦螺旋拿详,使觀察物位于焦點位置拭牌,旋轉細準焦螺旋直到樣本清楚聚焦;

  6. 轉換 40x 物鏡户克,調節(jié)粗細準焦螺旋對樣本進行聚焦方占,調節(jié)聚光器和光圈,使細節(jié)觀察更為清晰输僻;

  7. 需要油鏡觀察細胞結構時升院,物鏡轉換到 4x 物鏡下,對樣本聚焦春庇,滴加一滴顯微鏡浸油匠借,直接旋轉到 100x 油鏡下覆霹,調節(jié)細準焦螺旋聚焦樣本,調節(jié)聚光器和光圈胆快,使樣本觀察更為清晰煞陵;

  8. 使用完畢后,關掉電源或將光亮調到最小烁焙,將載物臺調至最低位置航邢,旋回 4x 物鏡到原來的位置,拿走載玻片骄蝇,必要時用鏡頭紙擦拭 100x 鏡頭膳殷。

  1. 需要根據(jù)制造商提供的說明書對光學顯微鏡進行保養(yǎng)和維護;

  2. 清潔鏡頭需要用到專用的鏡頭試紙乞榨,必要時使用清潔劑秽之,如甲醇或二甲苯,注意甲醇和二甲苯易燃且有毒吃既,避免直接用手接觸考榨,使用結束后立刻遮蓋試劑瓶;

  1. 準備一些備用燈泡鹦倚,更換燈泡要在切斷電源的情況下進行河质,待燈泡冷卻后更換新的燈泡,要求燈泡型號一致震叙,避免用手直接觸碰燈泡掀鹅,因為油脂會縮短燈泡壽命;

  2. 避免顯微鏡放置于高溫潮濕的地方媒楼,不使用時應該避光防塵保持出蛾,挪動顯微鏡時用雙手,一只手托住顯微鏡底盤观哲,另一只手握住鏡臂掏躬。

  1. 轉換物鏡時旋轉物鏡轉換器,而不是直接轉動物鏡担戏,避免滑脫物鏡導致?lián)p傷续疲;

  2. 不可將高倍鏡鏡頭與顯微鏡鏡油接觸,接觸后及時用清潔劑擦拭干凈堵生;

  3. 觀察結束后先將油鏡轉換成低倍鏡下嘁梦,再拿走載玻片,避免損傷鏡頭钾士,及時用擦鏡紙擦拭油鏡鏡頭滩蔼;

  4. 顯微鏡使用結束后,關閉電源或將光亮調至最小应揉,不用時關閉電源粥搓,蓋好防塵罩腐蛀。

臨床檢驗過程中,需要對樣本進行顯微鏡觀察回溺,因此以下為樣本檢驗的顯微鏡操作:

1.血細胞春贸、細胞學、體腔液和分泌物染片

  1. 低倍鏡下掃查遗遵,調節(jié)粗細準焦螺旋萍恕,找到觀察區(qū)域;

  2. 轉換高倍鏡车要, 調低聚光器 允粤,調節(jié)光圈找到合適的光強度,旋轉細準焦螺旋使樣本更清晰翼岁;也可 滴加一滴鏡油蓋上蓋玻片 类垫,在高倍鏡下也能清晰的觀察細胞(見圖 2 );

  3. 轉換低倍鏡琅坡,滴加鏡油悉患,旋轉轉換器到油鏡下, 調高聚光器榆俺,使貼近于玻片售躁,將光圈調大 ,旋轉細準焦螺旋扯殴,清晰觀察樣本(見圖 3 )缰鹏;

  4. 觀察結束,關閉電源或調低光亮至最小鬓惶,調低載物臺或旋轉到低倍鏡榄路,拿走玻片,擦拭油鏡鏡頭庞炕。

圖2 兩圖均為高倍鏡下的血細胞心篡,左圖為滴加一滴鏡油,蓋上蓋玻片后顯微鏡下觀察的結果泥出;右圖為未滴加鏡油觀察的結果(其他條件一致)柴怒。

圖3 左圖為犬皮膚肥大細胞瘤油鏡下觀察的結果尾疟;右圖為犬血涂片油鏡下觀察的結果(升高聚光器貼近于玻片)

2.糞便辟焚、尿液、皮膚活片和染片

  1. 糞便垫弱、尿液和皮膚活片低倍鏡下掃查究滞,調節(jié)粗細準焦螺旋,找到觀察區(qū)域装获, 調低聚光器 瑞信,增加對比度厉颤, 減少光圈 ,降低光強度凡简,轉換高倍鏡下觀察(注意蓋上蓋玻片逼友,避免污染鏡頭),調節(jié)細準焦螺旋秤涩,清晰觀察樣本(見圖 4 )帜乞;

  2. 糞便、尿液和皮膚涂片 低倍鏡下掃查筐眷,調節(jié)粗細準焦螺旋黎烈,找到觀察區(qū)域,旋轉到高倍鏡下匀谣,仔細掃查樣本照棋,需要油鏡下觀察時, 調高聚光器 武翎,貼近于玻片烈炭, 增大光圈 ,增強光強度督巍,滴加鏡油偷菩,轉換到油鏡下調節(jié)細準焦螺旋,清晰觀察樣本拄下。

圖4 兩圖均為糞便的活片咳蚣,左圖為降低聚光器顯微鏡結果;右圖為未降低聚光器的顯微鏡結果鸳咐。


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